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银杏内酯注射液抑制脑缺血再灌注模型大鼠内质网应激和

发布日期:2020-05-20 00:29   来源:未知   阅读:

缺血性卒中已经成为严重威胁人类健康的临床常见病,治疗手段以早期溶栓为主,但存在治疗时间窗短、不能改善再灌注损伤等问题。中药对脑缺血再灌注损伤的保护作用日益受到重视,如银杏类制剂在临床应用于心脑血管疾病多年,具有良好的疗效。

银杏内酯注射液(GIs)是国内首个获批上市的银杏萜类内酯单体组分含量达99%的注射液,其中银杏内酯B(GB)和白果内酯(BB)分别占34%和48%。研究认为,GB和BB为银杏类制剂中的重要活性成份,其作用机制包括抗兴奋性毒性、抑制氧化应激损伤、抗血小板聚集以及抗炎等,被认为是多靶点多效应的神经保护

越来越多的研究发现,内质网应激与自噬在脑缺血病理过程中发挥着重要作用。目前,关于银杏内酯是否影响缺血后内质网应激和自噬的研究较少,仅有少数研究报道,GB可以通过抑制内质网应激改善丁哌卡因刺激下SHSY-5Y细胞株的死亡,银杏总内酯可以抑制缺血后Beclin-1表达。本研究在验证GIs对脑缺血再灌注损伤治疗作用的基础上,探讨GIs对在体大鼠缺血再灌注内质网应激、自噬的影响,结果显示,GIs减轻脑缺血再灌注急性期损伤,其机制与抑制内质网应激和自噬相关。

研究方法

研究采用Longa法制备大鼠短暂性大脑中动脉阻塞(tMCAO)/再灌注损伤模型,于缺血再灌注1 h后腹腔注射(i.p.,bid)不同剂量的GIs(1.25、2.5、5 mg/kg),连续治疗3 d并进行神经功能评分,干湿重法测定脑组织含水量,TTC染色法测定脑梗死体积;银杏内酯注射液保护作用机制研究分为4组:假手术组(Sham)、假手术+GIs2.5 mg/kg组(Sham+GIs)、模型组(tMCAO+Saline)、模型组+GIs 2.5 mg /kg组(tMCAO+ GIs)。Sham+GIs组与tMCAO+GIs组缺血再灌注1 h给予GIs(i.p.,Bid,2.5 mg /kg),余2组同法给予无菌生理盐水,24 h和72 h时取样,Western Blotting法检测缺血半影区内质网应激、自噬等相关蛋白表达。

研究结果

1:GIs可以改善tMACO大鼠脑缺血再灌注损伤

再灌注后1 h给予GIs的各组大鼠,一般状态明显优于模型对照组。其中,2.5、5.0 mg/kg GIs组与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01,图1 A);脑组织含水量同样显示2.5、5.0 mg/kg GIs组明显低于模型对照组,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01,图1B);脑梗死体积结果显示(图1C和D),GIs 1.25、2.5、5.0 mg/kg均显著减少tMCAO大鼠脑梗死体积,与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结果提示,缺血再灌后1 h给予GIs具有改善tMCAO模型大鼠神经运动功能、减轻脑水肿、减小脑梗死体积的作用。

2:GIs抑制脑缺血再灌注损伤所诱导的内质网应激

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